治疗性功能障碍的中药提取物的制备方法及应用.pdf

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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010498335.6 (22)申请日 2020.06.03 (66)本国优先权数据 201910573435.8 2019.06.28 CN (71)申请人 成都南山药业有限公司 地址 610000 四川省成都市科园南路88号 天府生命科技园6栋8楼 (72)发明人 耿福能米军耿越飞 (51)Int.Cl. A61K 36/38(2006.01) A61P 15/10(2006.01) A61P 15/08(2006.01) (54)发明名称 一种治疗性功能障碍的中药提取。

2、物的制备 方法及应用 (57)摘要 本发明公开了一种治疗性功能障碍的中药 提取物的制备方法及应用。 本发明将地耳草的提 取物用于治疗性功能障碍, 主要是勃起功能障 碍、 少精、 弱精症等, 另外本发明还公开了所述的 地耳草提取物的制备方法以及该提取物具体为 地耳草中提取的总黄酮类成分, 其总黄酮的含量 不低于30; 通过药理实验及临床观察, 本发明 所述的地耳草提取物对勃起功能障碍有显著效 果, 具有提高精子活力、 数量和质量的作用, 对少 精症、 弱精症状具有良好的改善效果。 本发明制 备得到的药物服用方便、 天然、 安全、 无毒副作 用, 对勃起功能障碍、 少精症、 弱精症起效快、 效 果。

3、显著。 权利要求书1页 说明书15页 附图5页 CN 112138035 A 2020.12.29 CN 112138035 A 1.一种地耳草提取物在制备治疗性功能障碍药物中的应用。 2.根据权利要求1所述的一种地耳草提取物在制备治疗性功能障碍药物中的应用, 其 特征在于, 所述的地耳草提取物为地耳草中提取的总黄酮类成分, 其总黄酮的含量不低于 30。 3.根据权利要求1所述的一种地耳草提取物在制备治疗性功能障碍药物中的应用, 其 特征在于, 所述的性功能障碍为勃起功能障碍、 少精、 弱精中的任意一种或几种。 4.根据权利要求1所述的一种地耳草提取物在制备治疗性功能障碍药物中的应用, 其 特。

4、征在于, 所述药物的剂型为口服制剂, 如片剂或胶囊。 5.一种治疗性功能障碍的地耳草提取物的制备方法, 所述的制备方法为: 将地耳草切 成段, 加乙醇溶液回流提取23次, 第一次加入药材量1012倍乙醇溶液, 第二次加入8 10倍乙醇溶液, 每次提取1小时, 200目筛网滤过, 得滤液, 滤液减压浓缩至药液和药材的比 例为1: 1, 浓缩液上大孔吸附树脂柱, 收集洗脱液, 洗脱液浓缩回收溶剂, 放入真空干燥箱中 干燥即得。 6.一种治疗性功能障碍的地耳草提取物的制备方法, 所述的制备方法为: 将地耳草切 成段, 加纯化水回流提取23次, 第一次加入药材量1012倍量, 第二次加入810倍量, 。

5、每 次提取1小时, 200目筛网滤过, 得滤液, 滤液减压浓缩至药液和药材的比例为1: 1, 浓缩液上 大孔吸附树脂柱, 收集洗脱液, 洗脱液浓缩回收溶剂, 放入真空干燥箱中干燥即得。 7.一种治疗性功能障碍的地耳草提取物的制备方法, 所述的制备方法为: 将地耳草切 成段, 加1氢氧化钠醇溶液回流提取2次, 第一次加入药材量12倍, 第二次加入10倍, 每次 提取1小时, 200目筛网滤过, 得滤液, 滤液减压浓缩至药液和药材的比例为1: 1, 浓缩液加盐 酸调pH至中性, 离心, 离心液浓缩回收溶剂, 放入真空干燥箱中干燥即得。 8.一种治疗性功能障碍的地耳草提取物的制备方法, 所述的制备方。

6、法为: 将地耳草粉 粹, 加纯化水回流提取2次, 第一次加入药材量12倍, 第二次加入10倍, 每次提取1小时, 200 目筛网滤过, 得滤液, 滤液常压浓缩至药液和药材的比例为1: 1, 浓缩液用2倍乙酸乙酯萃取 两次, 取上层液, 减压浓缩回收乙酸乙酯, 并将浓缩液放入鼓风干燥箱中干燥即得。 9.一种中药提取物在制备治疗性功能障碍药物中的应用, 其特征在于, 所述的中药提 取物包含地耳草提取物。 权利要求书 1/1 页 2 CN 112138035 A 2 一种治疗性功能障碍的中药提取物的制备方法及应用 技术领域 0001 本发明属于中药技术领域, 具体涉及一种治疗性功能障碍的中药提取物的。

7、制备方 法及应用。 背景技术 0002 随着社会的发展, 人们的工作节奏越来越快, 生活压力也越来越大, 越来越多的男 性出现了性功能障碍。 在性功能障碍中常见的有勃起功能障碍、 少精症、 弱精症等。 0003 勃起功能障碍(erectile dysfunction, ED)是指阴茎持续不能达到和(或)维持足 够的勃起以获得满意的性生活。 据统计, 目前全球约20的成年男性患有ED, 并且呈逐年上 升趋势; 此外, 2型糖尿病、 心血管疾病、 血脂异常、 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征和心 理性因素等均可增加发生ED的风险。 异致患者出现勃起功能障碍的因素有很多, 如心理因 素、 身体条件因素。

8、、 身体疾病、 药物毒副作用以及环境因素等。 临床上对ED的治疗主要是针 对原发病的防治及心理上的疏导, 其长期疗效不甚理想, 从而严重影响着人们的生活质量, 降低工作效率、 增加医疗花费。 这既给公众的身心健康带来严重影响, 也给治疗手段带来了 挑战。 因此, 提供有效的治疗手段是当务之急。 0004 目前, ED的治疗方法大体分为非侵入性和侵入性两种: (1)非侵入性疗法: 该法主 要是 药 物 治 疗 , 用于临 床一 线 治 疗 , 最 具 有 代 表性的 是 磷 酸 二 酯酶 - 5 抑 制剂 (phosphodiesterase type 5 inhibitor, PDE5-i),。

9、 主要有: 西地那非、 他达拉非、 伐地那非 和阿伐那非。 这4种PDE5-i均有类似的疗效和副作用。 西地那非和伐地那非拥有相同的半衰 期, 均为4h; 而他达拉非的半衰期最长, 达17.5h; 阿伐那非的半衰期最短只有3h。 伐地那非 要谨慎用于Q-T间期延长患者。 (2)侵入性疗法: 该法包括阴茎海绵体内注射血管活性药物 等, 一般临床上用于二线治疗。 海绵体内注射血管活性药物可以单独使用, 也可以结合前列 腺素E1、 酚妥拉明、 血管活性肠肽、 罂粟碱和阿托品使用。 还有一些侵入性的二线治疗方案, 如尿道内前列腺素E1微球注入、 植入真空负压吸引装置和阴茎假体植入术, 这些侵入性疗 法。

10、均给患者带来了痛苦和很多不良反应。 0005 尽管目前用于ED治疗的方法很多, 但这些疗法仍令许多患者感到不满意、 不愿接 受或不能忍受等。 因此, 如何获得一种使用方便、 天然、 安全、 无副作用、 起效快速效果显著 的治疗勃起功能障碍的药物是业内亟待解决的技术问题。 0006 少精症是指精液中的精子数目低于正常具有生养能力男性的一种疾病。 即国际卫 生组织规定男性的精子在每毫升不低于2千万, 如果低于2千万就回为少精。 由精子数减少 而导致男性不育的发病率较高, 是男性不育的重要原因之一。 造成少精症的原因有生殖道 感染、 免疫因素、 精索静脉曲张、 内分泌异常、 精浆异常、 环境因素、 。

11、全身性疾病、 医源性及先 天性因素如隐睾、 纤毛不动综合征,以及特发性少精症等。 还有一些环境因素也会导致少精 的发生, 如环境污染, 电器辐射等等都会造成现代男性少精。 0007 弱精症是指2次精液常规分析A级精子少于25和A+B级精子小于50, 其他参 数正常或基本正常。 弱精症时, 精子无力前行, 难以穿过子宫颈管、 子宫腔, 直达输卵管与卵 说明书 1/15 页 3 CN 112138035 A 3 子结合, 因而造成生育能力低下。 导致弱精子症的常见原因有, 睾丸生精上皮不完全成熟或 受损变薄, 产生的精子素质差, 活动能力弱精液量少。 0008 因此研究开发一种提高精子活力和数量治。

12、疗少弱精症、 治疗勃起功能障碍改善性 功能的药物具有较好的市场前景。 0009 本申请所述的中药提取物为以地耳草为原料制备得到。 地耳草又名田基黄, 是藤 黄科(Guttiferae)金丝桃属属多年生草本植物, 具有清热解毒、 消肿止痛的功能, 可用于急 慢性肝炎、 泄泻、 痢疾、 毒蛇咬伤、 疮痈肿痛、 跌打损伤。 目前并未见地耳草用于性功能障碍 方面的报道。 发明内容 0010 本发明的主要目的是提供一种治疗性功能障碍的中药提取物的制备方法及应用, 旨在开发服用方便、 天然、 安全、 无毒副作用、 起效快、 效果显著的治疗勃起功能障碍、 少精、 弱精症的药物。 0011 本发明公开了一种地。

13、耳草提取物在制备治疗性功能障碍药物中的应用。 0012 进一步, 所述的地耳草提取物为地耳草总黄酮类成分, 其总黄酮的含量不低于 30。 0013 进一步, 所述的性功能障碍为勃起功能障碍、 少精、 弱精中的任意一种或几种。 0014 进一步, 所述药物的剂型为口服制剂, 如片剂或胶囊。 0015 本发明还公开了一种治疗性功能障碍的地耳草提取物的制备方法, 所述的制备方 法为: 将地耳草切成段, 加乙醇溶液回流提取23次, 第一次加入药材量1012倍乙醇溶 液, 第二次加入810倍乙醇溶液, 每次提取1小时, 200目筛网滤过, 得滤液, 滤液减压浓缩 至药液和药材的比例为1: 1, 浓缩液上。

14、大孔吸附树脂柱, 收集洗脱液, 洗脱液浓缩回收溶剂, 放入真空干燥箱中干燥即得。 0016 一种治疗性功能障碍的地耳草提取物的制备方法, 所述的制备方法为: 将地耳草 切成段, 加纯化水回流提取23次, 第一次加入药材量1012倍量, 第二次加入10倍量, 每 次提取1小时, 200目筛网滤过, 得滤液, 滤液减压浓缩至1: 1(药液: 药材), 浓缩液上大孔吸 附树脂柱, 收集洗脱液, 洗脱液浓缩回收溶剂, 放入真空干燥箱中干燥即得。 0017 一种治疗性功能障碍的地耳草提取物的制备方法, 所述的制备方法为: 将地耳草 切成段, 加纯化水回流提取23次, 第一次加入药材量1012倍量, 第二。

15、次加入810倍量, 每次提取1小时, 200目筛网滤过, 得滤液, 滤液减压浓缩至药液和药材的比例为1: 1, 浓缩液 上大孔吸附树脂柱, 收集洗脱液, 洗脱液浓缩回收溶剂, 放入真空干燥箱中干燥即得。 0018 一种治疗性功能障碍的地耳草提取物的制备方法, 所述的制备方法为: 将地耳草 切成段, 加1氢氧化钠醇溶液回流提取2次, 第一次加入药材量12倍, 第二次加入10倍, 每 次提取1小时, 200目筛网滤过, 得滤液, 滤液减压浓缩至药液和药材的比例为1: 1, 浓缩液加 盐酸调pH至中性, 离心, 离心液浓缩回收溶剂, 放入真空干燥箱中干燥即得。 0019 一种治疗性功能障碍的地耳草提。

16、取物的制备方法, 所述的制备方法为: 将地耳草 粉粹, 加纯化水回流提取2次, 第一次加入药材量12倍, 第二次加入10倍, 每次提取1小时, 200目筛网滤过, 得滤液, 滤液常压浓缩至药液和药材的比例为1: 1, 浓缩液用2倍乙酸乙酯 萃取两次, 取上层液, 减压浓缩回收乙酸乙酯, 并将浓缩液放入鼓风干燥箱中干燥即得。 说明书 2/15 页 4 CN 112138035 A 4 0020 一种中药提取物在制备治疗性功能障碍药物中的应用, 其特征在于, 所述的中药 提取物包含地耳草提取物。 0021 在本发明中, 所述药物的剂型为口服制剂, 如片剂或胶囊, 采用的辅料为常规辅 料, 如交联羧。

17、甲基纤维素钠、 硬脂酸镁、 微晶纤维素、 异麦芽酮糖醇、 二氧化硅、 羧甲基淀粉 钠等, 辅料的用量为本领域常规用量。 0022 本发明的有益效果 0023 本发明提供了一种中药提取物在制备改善性功能或少弱精症的药物中的应用, 所 述中药提取物为地耳草总黄酮类成分。 经药理研究发现, 本发明所述的中药提取物能够提 高勃起功能障碍大鼠及小鼠的交配能力, 增加捕捉次数和射精次数, 缩短勃起潜伏期, 同时 能有效提高其精子密度、 活力和活率, 对少弱精症状具有良好的改善效果, 能改善性腺轴靶 器官萎缩的趋势, 显著增加肾阳虚证雄性小鼠体内促肾上腺皮质激素的分泌, 增加其精子 数, 并且可以改善氢化可。

18、的松所致的性腺轴靶器官的病理变化。 通过对临床治疗观察, 结果 显示通过服用本发明所述的药物, 临床治疗总有效率能达到90, 可见本发明所述的药物 对性功能障碍中勃起功能障碍有显著性的疗效, 并且长期服用无明显毒副作用。 附图说明 0024 图1是ATCH标准曲线图; 0025 图2各组小鼠肾脏HE染色病理切片, 其中A.空白对照组; B.模型对照组; C.高剂量 组D.中剂量组E.低剂量组F.金匮肾气丸组; 0026 图3各组小鼠睾丸HE染色病理切片, 其中A.空白对照组; B.模型对照组; C.高剂量 组D.中剂量组E.低剂量组F.金匮肾气丸组; 0027 图4各组小鼠附睾HE染色病理切片。

19、图, 其中A.空白对照组; B.模型对照组; C.高剂 量组D.中剂量组E.低剂量组F.金匮肾气丸组; 0028 图5各组小鼠精囊腺HE染色病理切片图, 其中A.空白对照组; B.模型对照组; C.高 剂量组D.中剂量组E.低剂量组F.金匮肾气丸组; 具体实施方式 0029 下面通过具体实施方式来进一步说明本发明, 以下实施例为本发明具体的实施方 式, 但本发明的实施方式并不受下述实施例的限制。 0030 实施例1 0031 地耳草, 切成段, 加乙醇溶液回流提取2次, 第一次加入药材量12倍乙醇溶液, 第二 次加入10倍乙醇溶液, 每次提取1小时, 200目筛网滤过, 得滤液, 滤液减压浓缩。

20、至1: 1(药液: 药材), 浓缩液上大孔吸附树脂柱, 收集洗脱液, 洗脱液浓缩回收溶剂, 放入真空干燥箱中干 燥即得, 测定其干膏收率为1.9, 参照 中国药典 2015年版药典一部山楂叶含量测定项下 总黄酮测定法, 采用紫外可见分光光法测定。 本品按干燥品计算, 含总黄酮以槲皮苷 (C21H20O11)计含量为56.3, 得到提取物A。 0032 实施例2 0033 地耳草, 切成段, 加乙醇溶液回流提取2次, 第一次加入药材量10倍乙醇溶液, 第二 次加入10倍乙醇溶液, 每次提取1小时, 200目筛网滤过, 得滤液, 滤液减压浓缩至1: 1(药液: 说明书 3/15 页 5 CN 11。

21、2138035 A 5 药材), 浓缩液上大孔吸附树脂柱, 收集洗脱液, 洗脱液浓缩回收溶剂, 放入真空干燥箱中干 燥即得, 测定其干膏收率为1.5, 参照 中国药典 2015年版药典一部山楂叶含量测定项下 总黄酮测定法, 采用紫外可见分光光法测定。 本品按干燥品计算, 含总黄酮以槲皮苷 (C21H20O11)计含量为50.8, 得到提取物B。 0034 实施例3 0035 地耳草, 切成段, 加乙醇溶液回流提取2次, 第一次加入药材量10倍乙醇溶液, 第二 次加入8倍乙醇溶液, 每次提取1小时, 200目筛网滤过, 得滤液, 滤液减压浓缩至1: 1(药液: 药材), 浓缩液上大孔吸附树脂柱,。

22、 收集洗脱液, 洗脱液浓缩回收溶剂, 放入真空干燥箱中干 燥即得, 测定其干膏收率为1.2, 参照 中国药典 2015年版药典一部山楂叶含量测定项下 总黄酮测定法, 采用紫外可见分光光法测定。 本品按干燥品计算, 含总黄酮以槲皮苷 (C21H20O11)计含量为47.1, 得到提取物C。 0036 实施例4 0037 地耳草, 切成段, 加纯化水回流提取2次, 第一次加入药材量12倍量, 第二次加入10 倍量, 每次提取1小时, 200目筛网滤过, 得滤液, 滤液减压浓缩至1: 1(药液: 药材), 浓缩液上 大孔吸附树脂柱, 收集洗脱液, 洗脱液浓缩回收溶剂, 放入真空干燥箱中干燥即得, 测。

23、定其 干膏收率为2.5, 参照 中国药典 2015年版药典一部山楂叶含量测定项下总黄酮测定法, 采用紫外可见分光光法测定。 本品按干燥品计算, 含总黄酮以槲皮苷(C21H20O11)计含量为 39.3, 得到提取物D。 0038 实施例5 0039 地耳草, 切成段, 加1氢氧化钠醇溶液回流提取2次, 第一次加入药材量12倍, 第 二次加入10倍, 每次提取1小时, 200目筛网滤过, 得滤液, 滤液减压浓缩至1: 1(药液: 药材), 浓缩液加盐酸调pH至中性, 离心, 离心液浓缩回收溶剂, 放入真空干燥箱中干燥即得, 测定 其干膏收率为10.2, 参照 中国药典 2015年版药典一部山楂叶。

24、含量测定项下总黄酮测定 法, 采用紫外可见分光光法测定。 本品按干燥品计算, 含总黄酮以槲皮苷(C21H20O11)计含量 为36.4, 得到提取物E。 0040 实施例6 0041 地耳草, 粉粹, 加纯化水回流提取2次, 第一次加入药材量12倍, 第二次加入10倍, 每次提取1小时, 200目筛网滤过, 得滤液, 滤液常压浓缩至1: 1(药液: 药材), 浓缩液用2倍乙 酸乙酯萃取两次, 取上层液, 减压浓缩回收乙酸乙酯, 并将浓缩液放入鼓风干燥箱中干燥即 得, 测定其干膏收率为3.9, 参照 中国药典 2015年版药典一部山楂叶含量测定项下总黄 酮测定法, 采用紫外可见分光光法测定。 本。

25、品按干燥品计算, 含总黄酮以槲皮苷(C21H20O11) 计含量为54.3, 得到提取物F。 0042 实施例7 0043 将实施例1所制备的提取物A加入辅料制备为胶囊剂E, 具体制备工艺如下: 0044 混合、 制粒 0045 按配方比例称取地耳草提取物A150g、 微晶纤维素141g, 混合均匀, 得混合粉; 将 75乙醇溶液加入混合粉中, 搅拌混合5分钟制软材, 过16目筛制粒, 得湿颗粒; 0046 干燥、 整粒 0047 湿颗粒6070干燥至水分5, 过14目筛整粒, 得颗粒; 说明书 4/15 页 6 CN 112138035 A 6 0048 总混 0049 将羧甲淀粉钠6g加入。

26、颗粒中, 混合10分钟, 再加入硬脂酸镁3g, 继续混合10min, 混 合均匀, 得总混物料; 0050 填充、 抛光 0051 总混物料用0#明胶空心胶囊填充, 每粒装0.3g/粒, 抛光, 得胶囊G。 0052 实施例8 0053 将实施例2所制备的提取物B加入辅料制备为胶囊剂F, 具体制备工艺如下: 0054 混合、 制粒 0055 按配方比例称取地耳草提取物B 200g、 微晶纤维素70g、 二氧化硅15g, 混合均匀, 得混合粉; 将85乙醇溶液加入混合粉中, 搅拌混合5分钟制软材, 过16目筛制粒, 得湿颗 粒; 0056 干燥、 整粒 0057 湿颗粒6070干燥至水分5, 过。

27、14目筛整粒, 得颗粒; 0058 总混 0059 将羧甲淀粉钠12g加入颗粒中, 混合10min, 再加入硬脂酸镁3g, 继续混合5min, 混 合均匀, 得总混物料; 0060 填充、 抛光 0061 总混物料用0#明胶空心胶囊填充, 每粒装0.3g/粒, 抛光, 得胶囊H。 0062 实施例9 0063 将实施例1所制备的提取物A加入辅料制备为片剂G, 具体制备工艺如下: 0064 混合、 制粒 0065 按配方比例称取地耳草提取物A200g、 微晶纤维素275g、 交联聚维酮10g, 混合均 匀, 得混合粉; 将70乙醇溶液加入混合粉中, 搅拌混合5分钟制软材, 过20目筛制粒, 得湿。

28、 颗粒; 0066 干燥、 整粒 0067 湿颗粒6070干燥至水分5, 过20目筛整粒, 得颗粒; 0068 总混 0069 将硬脂酸镁5g加入颗粒中, 混合5分钟, 混合均匀, 得总混物料; 0070 压片 0071 总混物料用压片机压片, 得素片; 0072 包衣 0073 胃溶型薄膜包衣预混剂10g配制成14的包衣液。 素片置包衣锅内预热至3845 , 用上述包衣液进行薄膜包衣, 包衣结束后用冷风吹冷, 降温后收料, 得包衣片G。 0074 实施例10地耳草提取物在制备治疗性功能障碍或少弱精症的药物中的应用 0075 1材料与方法 0076 1.1材料 0077 氢化可的松, 成都艾科。

29、达化学试剂有限公司(纯度98); 金匮肾气丸, 北京同仁堂 科技发展股份有限公司制药厂; 补佳乐(戊酸雌二醇), 拜耳医药保健有限公司; 生理盐水, 成都市科龙化工试剂厂; 雌、 雄SD大鼠, 体重180-220g, 购于成都达硕实验动物有限公司; 超 说明书 5/15 页 7 CN 112138035 A 7 纯水: Water purifier实验室专用超纯水机。 电子分析天平: YP1201N, 上海精密科学仪器有 限公司; 精子质量检测系统: WLJY-9000型, 北京伟力新世纪科技发展有限公司。 0078 1.2方法 0079 SD雄性大鼠, 随机分成6组, 每组动物10只。 分别。

30、为空白对照组(生理盐水)、 模型组 (生理盐水)、 阳性对照组、 地耳草提取物B低剂量组、 地耳草提取物B中剂量组、 地耳草提取 物B高剂量组, 具体的情况见表1。 第四天开始给药, 除正常组外, 其余组皮下注射氢化可的 松25mg/kg, 每日1次, 连续7天, 造模同时给药。 雌鼠于交配前14天手术切除卵巢, 交配前48h 皮下注射戊酸雌二醇(20 g/只)和4h皮下注射黄体酮(500 g/只), 使之发情时间同步。 0080 表1地耳草提取物B对勃起功能障碍大鼠交配能力的影响试验计量设计 0081 0082 给予受试样品第30天, 灌胃1h后观察30min内大鼠交配能力(捕捉潜伏期、 捕。

31、捉次 数、 交配潜伏期、 交配次数)。 0083 实验结束后称重并处死, 即刻称取包皮腺、 睾丸、 前列腺-精囊腺等器官重量, 计算 生殖器官脏器系数。 0084 将附睾取出后用生理盐水冲洗干净, 一侧附睾尾部放入3ml 37生理盐水中, 剪 碎, 放置1分钟左右, 取少量精子混悬液, 加入缓冲液中, 37恒温水中存放5分钟, 取少量加 到预温计数板上, 采用WLJY-9000型精子质量检测系统(Computer-aided spermanalysis, CASA), 进行精子质量检查, 将精子混悬液涂于计数载玻片上, 选取4个视野, 2分钟内完成测 试。 0085 1.3数据统计方法 008。

32、6数据采用表示, 应用SPSS21.0软件进行统计分析。 计量资料数据若方差齐或 经转换后方差齐, 则采用单因素方差分析, 组间比较用LSD法, 若方差不齐, 数据经转换后方 差仍不齐, 采用秩和检验进行统计分析。 检验水平 0.05。 0087 2结果及分析 0088 2.1交配试验结果 0089 与空白对照组比较, 模型对照组捕捉潜伏期、 交配潜伏期增长, 具有非常显著的统 计学差异(P0.01), 捕捉次数、 交配次数减少, 具有统计学显著性差异。 地耳草提取物给药3 个给药组的动物的捕捉次数均明显增加(P0.01)。 与模型对照组比较, 试验组的动物的捕 捉潜伏期缩短, 均具有统计学差。

33、异(P0.05), 中剂量组P0.01有非常显著的统计学差异。 与 说明书 6/15 页 8 CN 112138035 A 8 模型对照组比较, 阳性对照组、 地耳草提取物低、 中剂量试验组的交配潜伏期缩短, 均具有 统计学差异(P0.05), 低、 中剂量组P0.01有非常显著的统计学差异。 与模型对照组比较, 阳性对照组、 低、 中、 高剂量组交配次数交配次数增加, 均具有统计学差异(P0.05), 其中阳 性对照及给药低、 中剂量组P0.01具有非常显著的统计学差异, 详细情况见表3。 0090 表2地耳草提取物对勃起功能障碍大鼠交配能力的影响(n10) 0091 0092 注: 与模型。

34、对照组比较, *表示P0.05, *表示P0.01; 与正常对照组比较, #表示 P0.05, #表示P0.01。 0093 2.2精子数量、 活力及活动率结果 0094 与空白对照组比较, 模型对照组动物精子数量和活动率下降、 精子密度下降具有 非常显著的统计学差异(P0.01)。 与模型对照组比较, 阳性对照组动物的精子数量增加、 精 子活动率升高; 低剂量组精子活力增加具有统计学差异(P0.05); 中、 高剂量组动物的精子 活动率上升、 精子活力、 精子密度明显增多, 均具有非常显著的统计学差异(P0.05); 第22天, 除空白对照组外, 其余各组体重均有下降。 模型对照组与空白对照。

35、组相比, 体重差 异具有统计学意义(P0.05), 但体重下降率均低于模型 对照组; 第28天, 除空白对照组外, 其余各组体重仍在下降。 模型对照组与空白对照组相比, 体重差异具有统计学意义(P0.05),地耳草提取物样品中剂量、 低剂量组体重和金匮肾气丸 组的体重差异有统计学意义(P0.01)且体重下降率均低于模型对照组。 初步判断地耳草提 取物样品和金匮肾气丸对肾阳虚小鼠体重降低, 都有一定的改善作用, 结果见表5。 0127表5地耳草提取物样品对小鼠体重变化值的影响(g,n10) 0128 0129 注: (1)模型对照组与空白对照组比较, #P0.05, #P0.01; 0130 (。

36、2)各给药组与模型对照组比较, *P0.01。 0131 2.2对脏器指数的影响 0132 与空白对照组相比, 模型对照组肾指数明显低于空白对照组, 其差异具有统计学 意义(P0.01), 地耳草提取物样品高剂量、 低剂量组的肾指数高于模型对照组, 其差异具有 统计学意义(P0.01, P0.05); 与空白对照组相比较, 模型对照组小鼠睾丸指数明显高于空 白对照组, 其差异具有统计学意义(P0.01), 与模型对照组相比, 地耳草提取物样品高剂 量、 中剂量、 低剂量组和金匮肾气丸组的睾丸指数均小于模型对照组, 差异均有统计学意义 (P0.05,P0.01, P0.01, P0.05), 与。

37、模型对照组相比, 地耳草提取物样品高剂量、 中剂 量、 低剂量组的附睾指数明显高于模型对照组, 差异具有统计学意义(P0.01, P0.01, P0.05); 与空 白对照组相比, 模型对照组精囊腺指数高于空白对照组, 其差异具有统计学意义(P0.01), 与模型对照组相比, 地耳草提取物样品高剂量、 中剂量组和金匮肾气丸组的精囊腺指数明 显低于模型对照组, 其差异有统计学意义(P0.05, P0.01, P0.01), 说明地耳草提取物样 品有改变肾脏萎缩、 附睾萎缩睾丸膨胀、 精囊腺膨胀的趋势。 对各脏器指数的影响结果见表 6。 0133表6地耳草提取物样品对小鼠各脏器指数的影响(mg/g。

38、) 说明书 10/15 页 12 CN 112138035 A 12 0134 0135 注: (1)模型对照组与空白对照组比较, #P0.05, #P0.01; 0136 (2)各给药组与模型对照组比较, *P0.05, *P0.01。 0137 2.3对肾阳虚小鼠交配能力的影响 0138 与空白对照组相比, 模型对照组骑跨潜伏时间明显长于空白对照组, 其差异具有 统计学意义(P0.05), 地耳草提取物样品高剂量、 中剂量组 与金贵肾气丸组的骑跨潜伏时间明显低于模型对照组, 差异具有统计学意义(P0.01,P 0.05,P0.05); 与空白对照组相比较, 模型对照组每分钟平均骑跨次数明显。

39、低于空白对照 组, 其差异具有统计学意义(P0.05), 地耳草提取物 样品高剂量、 中剂量组与金贵肾气丸组的每分钟平均骑跨次数明显高于模型对照组, 差异 具有统计学意义(P0.01,P0.01,P0.01), 说明地耳草提取物样品和金匮肾气丸均可提高 肾阳虚小鼠的交配能力, 见表7。 0139表7地耳草提取物样品对肾阳虚小鼠交配能力的影响 0140 0141 注: (1)模型对照组与空白对照组比较, #P0.05, #P0.01; 0142 (2)各给药组与模型对照组比较, *P0.05, *P0.01。 说明书 11/15 页 13 CN 112138035 A 13 0143 2.4对血。

40、清中ACTH的影响 0144 与空白对照组相比, 模型对照组血清中ACTH低于空白对照组, 其差异具有统计学 意义(P0.05),与模型对照组相比, 各给药组血清中ACTH含量都高于模型对照组, 差异均具 有统计学意义(均P0.01), 证明地耳草提取物样品能够有效增加肾阳虚小鼠血清中的 ACTH, 改善肾阳虚证, 见表8。 0145表8地耳草提取物样品对小鼠血清中ACTH水平的影响 0146 0147 0148 注: (1)模型对照组与空白对照组比较, #P0.05, #P0.01; 0149 (2)各给药组与模型对照组比较, *P0.01。 0150 ATCH标曲回归方程: y(A-D)/。

41、1+(x/C)B+D, r20.9649, 标准曲线见图1。 0151 2.5病理切片观察 0152 2.5.1肾脏切片 0153 空白对照组小鼠肾组织组织被膜完整, 皮髓质分界清晰, 皮质肾小管排列紧密, 分 界清晰, 上皮细胞形态正常, 肾小球数量丰富, 结构未见明显改变, 未见明显异常; 模型对照 组肾脏组织被膜完整, 皮髓质分界清晰, 皮髓质交界处少量肾小管、 集合管扩张, 皮质及髓 质均可见淤血, 间质较多红细胞, 局部可见大量肾小管上皮细胞胞核固缩深染, 细胞分界不 清, 部分胞质疏松淡染, 少量肾小管上皮细胞脱落, 少量肾小管管腔内可见嗜酸性团块; 地 耳草提取物样品高剂量组肾脏。

42、组织被膜完整, 皮髓质分界清晰, 皮质肾小管排列紧密, 分界 清晰, 上皮细胞形态正常, 间质可见淤血, 肾小球数量丰富, 结构未见明显改变, 未见其它明 显异常; 地耳草提取物样品中剂量组肾脏组织被膜完整, 皮髓质分界清晰, 皮质少量肾小管 内充满嗜酸性蛋白液, 形成管型, 皮质轻度淤血, 间质可见少量红细胞, 肾小球数量丰富, 结 构未见明显改变, 未见其它明显异常; 地耳草提取物样品低剂量组肾脏组织被膜完整, 皮髓 质交界处少量集合管扩张, 肾小管上皮细胞形态正常, 皮质及髓质均可见淤血, 间质较多红 细胞, 肾小球数量丰富, 结构未见明显改变, 未见其它明显异常; 金匮肾气丸组肾脏组织。

43、被 膜完整, 皮髓质分界清晰, 皮质肾小管排列紧密, 分界清晰, 上皮细胞形态正常, 肾小球数量 丰富, 结构未见明显改变, 未见明显异常, 结果见图2。 0154 2.5.2睾丸切片 0155 空白对照组组织外膜完整, 曲精小管分界清晰, 排列较疏松, 管腔内生精细胞、 支 持细胞数量丰富, 排列疏松, 并可见长梭形精子, 未见其它明显异常; 模型对照组小鼠组织 外膜完整, 曲精小管分界清晰, 排列较疏松, 少量曲精小管内生精细胞、 支持细胞数量减少, 排列紊乱, 局部曲精小管内可见生精细胞脱落, 未见其它明显异常; 地耳草提取物样品高剂 说明书 12/15 页 14 CN 11213803。

44、5 A 14 量组睾丸组织外膜完整, 曲精小管分界清晰, 排列较疏松, 管腔内生精细胞、 支持细胞数量 丰富, 排列较疏松, 并可见长梭形精子, 未见其它明显异常; 地耳草提取物样品中剂量组睾 丸组织外膜完整, 曲精小管分界清晰, 排列较疏松, 间隙增宽, 个别曲精小管内生精细胞数 量减少, 排列疏松, 未见其它明显异常; 地耳草提取物样品低剂量组睾丸组织外膜完整, 曲 精小管分界清晰, 排列较疏松, 曲精小管内生精细胞、 支持细胞排列较紊乱疏松, 少量曲精 小管内可见生精细胞脱落入管腔, 未见其它明显异常; 金匮肾气丸组睾丸组织外膜完整, 曲 精小管分界清晰, 排列较疏松, 管腔内生精细胞、。

45、 支持细胞数量丰富, 排列较疏松, 并可见长 梭形精子, 未见其它明显异常, 结果见图3。 0156 2.5.3附睾切片 0157 空白对照组组织附睾管结构清晰, 管腔内精子数量丰富, 上皮为假复层柱状上皮, 上皮细胞排列规则, 形态正常, 未见明显异常; 模型对照组组织附睾管结构清晰, 管腔内精 子数量明显减少或消失, 局部管腔内可见嗜酸性蛋白液, 上皮为假复层柱状上皮, 上皮细胞 较厚、 排列规则, 未见其它明显异常; 地耳草提取物样品高剂量组组织附睾管结构清晰, 管 腔内精子数量丰富, 上皮为假复层柱状上皮, 上皮细胞排列规则, 形态正常, 未见明显异常; 地耳草提取物样品中剂量组组织附。

46、睾管结构清晰, 局部管腔内精子数量明显减少或消失, 少量管腔内可见嗜酸性絮状物, 上皮为假复层柱状上皮, 少量上皮细胞肿胀, 胞质疏松淡 染, 未见其它明显异常; 地耳草提取物样品低剂量组组织附睾管结构清晰, 局部管腔内精子 数量明显减少或消失, 少量管腔内可见嗜酸性蛋白液, 上皮为假复层柱状上皮, 上皮细胞较 厚、 排列规则, 未见其它明显异常; 金匮肾气丸组组织附睾管结构清晰, 管腔内精子数量丰 富, 上皮为假复层柱状上皮, 上皮细胞排列规则, 形态正常, 未见明显异常, 结果见图4。 0158 2.5.4精囊腺切片 0159 空白对照组组织各层结构清晰, 黏膜层可见较多皱襞, 黏膜层上皮。

47、为单层柱状上 皮, 上皮细胞排列紧密, 形态正常, 腔内充满嗜酸性物质, 未见明显异常; 模型对照组组织各 层结构清晰, 黏膜层可见较多皱襞, 黏膜层上皮为单层柱状上皮, 少量上皮细胞肿胀, 胞质 疏松淡染或呈空泡状, 腔内充满嗜酸性物质, 肌层可见少量不规则空洞, 局部肌层少量血管 淤血扩张, 未见其它明显异常; 地耳草提取物样品高剂量组组织各层结构清晰, 黏膜层可见 较多皱襞, 黏膜层上皮为单层柱状上皮, 上皮细胞排列紧密, 形态正常, 腔内充满嗜酸性物 质, 未见明显异常; 地耳草提取物样品中剂量组组织各层结构清晰, 黏膜层可见较多皱襞, 黏膜层上皮为单层柱状上皮, 较多上皮细胞肿胀, 。

48、胞质疏松淡染或呈空泡状, 腔内充满嗜酸 性物质, 肌层可见少量不规则空洞, 未见其它明显异常; 地耳草提取物样品低剂量组组织各 层结构清晰, 黏膜层可见较多皱襞, 黏膜层上皮为单层柱状上皮, 较多上皮细胞肿胀, 胞质 疏松淡染或呈空泡状, 腔内充满嗜酸性物质, 肌层可见少量不规则空洞, 未见其它明显异 常; 金匮肾气丸组组织各层结构清晰, 黏膜层可见较多皱襞, 黏膜层上皮为单层柱状上皮, 上皮细胞排列紧密, 形态正常, 腔内充满嗜酸性物质, 未见明显异常, 结果见图5。 0160 2.6.结论 0161 肾阳虚在临床上主要表现为神疲乏力、 精神不振、 活力底下、 畏寒肢冷、 四肢发凉、 腰膝酸。

49、痛、 性功能减退、 阳痿、 早泄、 小便清长、 尿少或夜尿频多, 或咳喘痰鸣、 小腹牵引睾丸 坠胀疼痛、 阴囊收缩、 须发易脱落、 早白, 形体虚胖或羸瘦, 而地耳草提取物样品可改善上述 症状。 本实验通过注射氢化可的松注射液造成小鼠肾阳虚, 后探究地耳草提取物样品在改 说明书 13/15 页 15 CN 112138035 A 15 善肾阳虚症状方面的作用, 从以上实验结果可知, 地耳草提取物样品能改善性腺轴靶器官 萎缩的趋势, 能显著增加肾阳虚证雄性小鼠体内促肾上腺皮质激素的分泌, 增加其精子数, 并且可以改善氢化可的松所致的性腺轴靶器官的病理变化, 可知地耳草提取物样品在改善 肾阳虚证方。

50、面具有一定的作用。 本实验主要针对下丘脑-垂体-性腺轴研究地耳草提取物样 品在改善肾阳虚证方面的作用, 还可进一步从代谢组学方面探讨地耳草提取物样品改善肾 阳虚的作用机制。 0162 实施例12本发明所述药物在临床上的观察应用 0163 为了验证本药物治疗勃起功能障碍的疗效, 做了病例试验, 选取有勃起障碍的患 者共30例, 年龄在30岁到70岁之间, 均为已婚或者是有固定性伴侣, 并且均有性经验。 患者 的外生殖器、 睾丸、 前列腺以及附睾等均没有发现有器质性病变。 排除恶性肿瘤患者、 精神 病史患者、 吸毒或者酒精依赖患者。 采用数字随机表法随机将患者分为三组, 每组10人。 0164 观。

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内容关键字: 治疗 性功能 障碍 中药 提取物 制备 方法 应用
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